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protein assay bio rad 在 [問題] Bio-Rad protein assay 的使用問題- biotech | PTT職涯區 的推薦與評價
請問各位大大有關BioRad protein assay的問題, 我不是相關領域的研究生,所以不太瞭解使用的方法, 而我的實驗部分是, 因為我必須求出在不同pH值下的蛋白質分離量, ... ... <看更多>
protein assay bio rad 在 Re: [求救] BCA與Bio-Rad protein assay kit.... - 看板Biotech 的推薦與評價
※ 引述《Fourfish (~四條魚~)》之銘言:
先感謝四條魚一同來討論~
: 不知道你用BCA測的很高是有多高?
: 你應該有換算出sample的濃度吧?
我之所以沒有辦法換算出濃度是因為超過我自製的檢量線範圍了,
我所配置的檢量線並不是參照說明書上的做到1500 ug/ml
而是先做到500 ug/ml,在這個濃度下BCA的吸光值是0.772,
而我後續有些蛋白質的分析中,吸光值都已經破2.0了,
當然我知道這樣的相對比較並不準確,
不過至少濃度應該是有超過500 ug/ml的。
: 就你所說得靈敏度來看
: BCA: 0-100 ug/ml
: Bio-Rad: 200-900 ug/ml
: 中間100-200很明顯有個落差在
: 如果sample有110 ug/ml或190 ug/ml
: 對BCA來說都是爆表 但對Bio-Rad來說都是不足量
: 所以你怎麼會覺得sample的濃度不會低於Bio-Rad的最低極限200 ug/ml?
很不好意思我在描述上可能會造成誤導,BCA超過100 ug/ml並不會爆表,
我只是想要描述BCA這個Kit在低濃度也有很好的線性關係,
這點是Bio-Rad Kit不敢保證的部份,所以他最低建議 200 ug/ml,
同上面解釋過的,我想我感到疑惑的部分應該不是落在那個模糊的濃度區間內。
: 還有 實驗做法可以再說明清楚一點
: 因為就算是同一套測濃度的試劑
: 裡面也有不同的做法 大量跟微量的做法是有差異的
我有注意到兩個Kit中都有提到試管跟微盤的分析方式,
我兩者都是採用試管分析的方式來做比較的,不過結果卻有天大的差異,
真的讓我相當苦惱....
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