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*In Vitro test on keratinocytes mitochondria
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in vitro細胞 在 臨床筆記 Facebook 的最佳解答
SARS-CoV-2的疫苗研發製造的策略:
1.去活化病毒疫苗(inactivated virus vaccines):
病毒已經是被用物理的或化學的去活化(Viruses are physically or chemically inactivated),但是仍然保存病毒顆粒的完整性(preserve the integrity of the virus paticle),它們充當免疫抗原(immunogen)。
2.病毒類似的顆粒或奈米顆粒的疫苗(Virus -like particle or nanoparticle vaccines):
結構性的病毒的蛋白質已經被共同表現(structural viral proteins are co-expressed),,形成沒有感染性的顆粒(form non-infectious particles),來當作疫苗的免疫抗原(vaccine immunogen),它們類似真實的類病毒(real virions)但是缺乏病毒的基因體(lack the virus genome)。
3.蛋白質次單元的疫苗(Protein subunit vaccines):
這種策略只有包括關鍵性的病毒的蛋白質或胜太(only key proteins or peptides),它們能夠在細菌(bacteria)酵母菌(yeast)昆蟲或脯乳類細胞(insect or mammalian cells)中在人體外被製造(manufactured in vitro),目前最大多數的在臨床期和臨床前期階段登錄在案候選的SARS-CoV-2疫苗,都是根據這種策略研發製造的。
4.病毒引導導航導向的疫苗(virus-vectored vaccines):
編碼致病原抗原的基因(genes encoding pathogen antigen),是被導入非複製的或複製的病毒載體(cloned into non-replicating or replicating virus vectors)例如腺病毒(adenvirus),這些抗原在免疫化作用後,由被轉換的宿主細胞產生(the antigens are produced by transduced host cells after immunization)。
5.DNA和mRNA疫苗(DNA and mRNA vaccines):
DNA和mRNA疫苗(DNA and mRNA vaccines),有可以快速製造用來抵抗突現性的致病原的優勢(DNA and mRNA vaccines have the advantage of rapid manufacturing against pathogens),DNA 疫苗(DNA vaccines),藉由再重組的DNA 質體所編碼的病毒的抗原(viral antigens encoded by a recombinant DNA plasmid),在宿主細胞中經由次序性的轉錄到轉譯的過程產生(produced in host cells via sequential transcription-to translation process)。相反地,mRNA 疫苗(mRNA vaccines)是藉由在人體外的轉錄過程被合成(synthesized by in vitro transcription),它們經由在人體內的直接的蛋白質轉譯,在細胞質中產生病毒的抗原(they produce viral antigens in the cytoplasm through direct protein trsnslation in vivo)。
6.活的減毒的病毒疫苗(Live-attenuated virus vaccines):
在這種策略中,病毒是藉由在人體外或人體內的過程或反向的遺傳的突變的產生作用而被減毒(virus is attenuated by in vitro or in vivo passage or reverse genetic mutagenesis),這個結果病毒變成沒有致病性或變成弱的致病性(the resulting virus becomes non-pathogenic or weakly pathogenic),但是仍然維持保持類似活的病毒感染的免疫抗原性(retains immunogenecity by mimicking live virus infection)。
資料來源:
Viral targets for vaccines against COVID-19
Nature Reviews Immunology(2020)18 DEC 2020)
感謝 #Cheng_Sheng_Tai 醫師提供資料
in vitro細胞 在 Dr 文科生 Facebook 的精選貼文
《如果沒有一定的科學訓練,你真的會被這種偽科學技巧誤導》
灼見名家出了一篇新聞稿,內有顧小培的回應,內裡有不少常見的偽科學技巧,今日我們來一起分析
我逐點回應顧小培的逐點回應(詳情請看圖及reference)
1. #從未打算盡論證責任
其實講完又講,到今日你有證據支持mRNA疫苗會導致「甲基轉移酶」的產生和肺纖維化的副作用了沒有?
如果mRNA疫苗會導致所謂的
“「甲基轉移酶」,將肺的成纖維細胞EGFR的接受體拉在一起,使之分泌會令肺纖維化的膠原蛋白,之後便導致肺衰竭,病人便容易因此死亡。”
為何第一、二、三期臨床試驗都無相關數據?就算你打算詭辯去講這種「副作用」需時幾年才出現的話,如此significant的”mechanism”為何至今都未有被發現或發表?
你的論點是mRNA疫苗會導致多重器官纖維化,那麻煩你提出相關的證據,或起碼證明你個proposed mechanism is reasonably achievable
2. #試圖轉移視線
一開始講到全世界藥廠、醫生和科學家不敢製作滅活疫苗,但被踢爆其實不少藥廠和大學都在研發,只是需時良久時,就轉移視線講話覺得科興很厲害。
所以藥廠學者和大學是敢還是不敢?講3000加侖病毒洩漏再要封鎖大廈的風險到底想帶出什麼論點?
*又,滅活疫苗有多年研究的歷史,不少病毒疫苗都是滅活形式製作,並非所謂的「藥廠很怕」
3. #突然講Pharmacokinetic
首先我很想知道到底顧小培有沒有認真分析藥廠公開的研究報告,一開始話肺部沒有IgG,被踢爆其實肺部有IgG後就轉移視線講pharmacokinetic叫人證明有幾多IgG去到肺部防止感染,
當我們將同樣準則套用在顧小培熱情地賣的「四寶」時,便會發現他從來無證明過四寶於人類的pharmacokinetic, pharmacodynamic, bioavailability 數據、有效劑量、中毒劑量、安全性、副作用、治病或防感染的效果、安慰劑對照的數據等等。
正如之前文章我都有講,不少有效預防或減輕呼吸道感染的疫苗都是IgG疫苗,例如流感和肺炎鏈球菌。根本不存在必須IgA疫苗才有效的理論。
4. #突然講研究methodology & stratification
有趣的是顧小培在反駁Dr Sid的論點時突然提出疫苗需有高質的臨床研究和設計準則。又舉例說要stratify受試者的生活起居飲食習慣,沒有嚴格控制生活習慣的研究測試結果很粗糙。的確我們要critically appraise臨床研究的methodology,但你appraise人地份報告總得substantiate你的論點吧,一句「我覺得好粗糙」就當論證完,萬能key嗎?
顧小培又以日本人食較多澱粉質而美國人則多吃蛋白質,要將受試者分開一層一層才能有具意義的數據。這本質上沒有錯,所以不少藥物研發時都會於不用國家進行(Multicentre trial)再比較不同國家、種族、年齡、性別和其他有可能相關的背景資料,再從統計學裡計算數據,證明是否對不同的群體都有效。
不過我希望顧小培標準可以一致,當你要求臨床研究要stratification時(其實人地有做stratification),你熱情地向民眾推廣的「四寶」建基於的研究大多是體外實驗室進行(In Vitro),只有小部分有用老鼠進行,而研究規模亦屬小型,未見有大型臨床研究。
而我不知道由幾時開始人類跟老鼠的種族、飲食習慣、年齡、生活習慣等等有相似的地方,可以比較或stratify?
到底老鼠食幾多澱粉或蛋白質、起居飲食生活習慣有幾相似,老鼠要不要返學返工,會不會做家務做gym做yoga和去酒店staycation?
人類跟老鼠的分別竟然不及日本人跟美國人的分別,此等論述實在令我讚嘆不已。
How does this logic even work?
5. #電腦生成模擬是病毒研究的里程碑並不代表臨床上有作用
的確,電腦生成模擬是研究重要的一環,但不代表現階段臨床上有作用。千千萬萬個從電腦模擬中得出的「可能性」或「原理」現實裡過不到臨床試驗的這一關。即使電腦模擬顯示一個結果,如果現實中沒有實際治病或改善疾病的效果也是徒然。
是的,你自己都識講研究藥物是一步一步得來的,點解你的「Docking」理論可以跳過所有步驟,言之鑿鑿去講你熱情地賣的那些只有preclinical和實驗室體外及老鼠研究的「四寶」有防感染甚至治癌防癌的效果?
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最後,我想再重申,你的學歷、在哪裡做過、有什麼專利並不會令錯的論述變成對的。你對病人或其他人的醫療諮詢並不符合我們對具質素的醫療諮詢的要求。
打不打疫苗是一個informed consent & decision但information必須準確,想先觀察再決定打還是不打是很合理的選擇。
你可以同大家講mRNA疫苗是新型疫苗,長遠效果或安全性仍未完全了解,呼籲大家謹慎考慮再決定。但我不會跟大家講一些似是而非的mRNA疫苗可令多重器官纖維化等無醫學實證的說話。
同時我亦不會去跟病人推廣一些只有preclinical跟小型老鼠實驗的結果的「保健品」再包裝成有病醫病無病強身防感染的聖物。
完全錯誤和荒謬的人不危險,因為很容易就會被世人看穿。
這種有科學知識,但故意夾雜一些正確和一些不正確知識和概念的人,是最危險亦是最容易令普羅大眾誤信。
一個具質素的諮詢必要條件是病人要被fully informed有關治療的證據、風險和成效、治療或不治療的風險、其他可行的選擇及其證據。
我倒想知道顧小培諮詢病人時有無fully inform病人「四寶」的證據是建基於實驗室和老鼠,無大型人類臨床試驗支持?定還是講一兩句「有論文有文獻支持」就當盡了論證責任?
#慎防偽科學
#似是而非的論述最危險
in vitro細胞 在 Re: [討論] in vivo 和in vitro 定義- 看板Biotech - 批踢踢實業坊 的推薦與評價
※ 引述《linker0726 (悶熱天氣)》之銘言:
: 這兩個的定義 我看paper好像定義都不一樣
: 我的想法是
: in vitro 指的是操作DNA RNA PROTEIN等細胞外的實驗
: in vivo 操作細胞 (死或活) 或者是動物實驗
: 其中操作細胞 兩者都有人定義...
: 請問哪個會比較適當呢
: 謝謝
in vivo 的拉丁文原義是指在活體內的意思,也能指單細胞生物.
in vitro 拉丁文指得是"在玻璃中"的意思, 延伸指在人工環境中.
不過一般使用的細胞株因為是自活體中分離出來,
精確來說是 ex vivo, 不適用 in vivo.
但是現在許多分生研究中, 會以 in vivo/in vitro 區分活細胞實驗與細胞外模擬實驗,
雖然嚴格來說, 這不是十分精確的定義.
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偶滴部落格: https://www.wretch.cc/blog/wchienkai
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.228.88.85
回頭參考一下 wiki 相關的描述:
"In molecular biology 'in vivo' is often but incorrectly used to refer to
experimentation done in live isolated cells rather than in a whole organism,
for example, cultured cells derived from biopsies. In this situation,
the correct term is 'ex vivo'.
Once cells are disrupted and individual parts are tested or analyzed,
this is known as 'in vitro'"
原文出自: https://en.wikipedia.org/wiki/In_vivo
一般自動物活體移出的 organ, tissue, cell, 適用於 ex vivo 來描述"移出活體實驗",
但從另一個角度來看, 若要描述其"在人工環境培養"時, 以 in vitro 亦無不可.
這就要看寫文章的人要選用那一個角度去描述了.
※ 編輯: wchienkai 來自: 125.231.132.192 (11/03 01:16)
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